Lineas de Investigación

Identificación de epitopes de linfocitos T contra T. cruzi en pacientes con Enfermedad de Chagas crónica (Integrante involucrado: Dra. Fátima Ferragut).
La caracterización de los péptidos presentados a las células T CD4+ y CD8+ en el contexto de las moléculas del complejo mayor de histocompatibilidad (CMH), es fundamental tanto en la comprensión de las bases biológicas y moleculares de la enfermedad, como en el origen de nuevas y eficaces inmunoterapias. Hasta el momento, únicamente un poco más de 100 epitopes de T. cruzi se han descripto (los cuales sólo pertenecen a 62 proteínas del vasto proteoma del parásito, comprendido por 22.570 genes codificantes de proteínas), siendo la mayoría restringidos a un único haplotipo de HLA tipo I. En nuestro laboratorio, aplicando la estrategia de predicción bioinformática de epitopes T basada en redes neuronales artificiales, hemos identificado 7 péptidos que contienen epitopes activadores de secreción de IFN-γ en muestras de células mononucleares (CMN) de pacientes con enfermedad de Chagas crónica. Como continuación de este trabajo, la presente línea de investigación estudia el repertorio de los péptidos (inmunopeptidoma) de T. cruzi que son procesados naturalmente y presentados en el contexto del CMH, mediante la combinación de espectrometría de masas y análisis bioinformático. Esta aproximación nos ha permitido identificar péptidos provenientes de antígenos de T. cruzi tanto intracelulares como de superficie. Los mismos serán validados mediante diferentes estrategias que posibilitarán caracterizar la respuesta inmune que dichos complejos inducen al ser mostrados a los linfocitos T de los pacientes con diferente estadio clínico de la Enfermedad de Chagas.


Abordaje experimental del estudio del inmunopeptidoma humano en el contexto de la infección con T. cruzi.

Rol de los componentes del sistema inmune en la respuesta ant-T. cruzi en el contexto de la Enfermedad de Chagas crónica (Integrantes involucrados: Bioq. Karen M. Cruz).
A pesar de años de investigación y discusión, se desconoce la razón por la cual mientras que algunos individuos desarrollan sintomatología, otros no lo hacen. La evidencia acumulada señala que la respuesta inmunitaria del paciente juega un rol central en ese proceso. Nuestro objetivo es estudiar en forma integral los eventos inmunológicos que ocurren en las células del sistema inmune de los individuos en respuesta a los antígenos de T. cruzi durante la fase crónica de la enfermedad de Chagas. Para ello, proponemos analizar el perfil de expresión génica de las células mononucleares provenientes de pacientes con enfermedad de Chagas crónica, con y sin sintomatología demostrable, frente a la estimulación con antígenos de T. cruzi, e integrar esta información con otros datos de caracterización fenotípica y funcional de las células y los datos clínicos de los pacientes. Este proyecto busca incorporar un nuevo integrante para la realización de una tesis doctoral con beca ANCyT otorgada.

Abordaje experimental

Asimismo, es nuestro interés estudiar el rol de los mecanismos de regulación desarrollados por el sistema inmune, en particular el de los linfocitos CD4+ LAG-3+, los cuales se encuentra aumentados en los pacientes sin sintomatología detectable.

Abordaje experimental

Caracterización funcional de nuevas proteínas identificadas en T. cruzi (Integrantes involucrados: Dra. Mariana Potenza, Lic. Jessica Rodríguez Durán, Dra. Karina Gómez, Lic. Micaela Ossowski, Lic. Juan Pablo Gallardo).

Este proyecto busca incorporar un nuevo integrante para la realización de una tesis doctoral con beca ANCyT otorgada.
Al igual que otras especies, T. cruzi expresa un alto porcentaje de proteínas hipotéticas conservadas, exclusivas de la familia de los tripanosomátidos y cuya función es desconocida. El estudio funcional de estas proteínas permite avanzar en el conocimiento de la biología del parásito, definiendo actividades metabólicas únicas, distintas de las células de mamífero que este parasita. La caracterización de estas vías y sus componentes pueden establecer nuevos blancos terapéuticos potenciales para el tratamiento de esta enfermedad. Actualmente llevamos adelante el estudio funcional de dos proteínas exclusivas de T. cruzi, mediante el uso de herramientas de ingeniería genética y biología celular: 1. Una nueva proteína con dominios de unión a Ca⁺² (TcCAL1), evaluando su rol en procesos importantes del ciclo de vida del parásito, como la diferenciación y la invasión a células de mamífero; 2. Una proteína con dominios de quinoproteína alcohol deshidrogenasa (Tc323), estudiando su relevancia en la proliferación y el metabolismo de detoxificación celular del parásito. Además, esta proteína presenta un potencial uso como diagnóstico de enfermedad en la fase crónica.

Abordaje experimental y resultados obtenidos en la caracterización funcional de proteínas sin función asignada en T. cruzi (anotadas como hipotéticas en la base de datos de Proyectos Genoma de Tripanosomas)

Expresión de proteínas recombinantes utilizando tripanosomas no patógenos (Integrante involucrado: Dra. Potenza)
Mediante el uso de sistemas comerciales y del diseño y la construcción de líneas transgénicas en nuestro laboratorio, utilizamos cultivos de especies de tripanosomas no patógenos (Leishmania tarentolae, Crithidia fasciculata) como biorreactores para la expresión de antígenos y proteínas que requieran modificaciones post-traduccionales complejas para su actividad.